Primero, el tiempo de centrifugación.
El tiempo de centrifugación es un factor muy importante que afecta el efecto centrífugo. El tiempo de centrifugación requerido para diferentes métodos de centrifugación será diferente. La siguiente es una introducción detallada de la centrifugación diferencial y la centrifugación de gradiente de densidad igual y la centrifugación de gradiente de densidad. Para la centrifugación diferencial, el tiempo de centrifugación se refiere al momento en que una determinada partícula se asienta completamente en el fondo del tubo de centrifugación; para la centrifugación en gradiente de isodensidad, el tiempo de centrifugación se refiere al tiempo de equilibrio en el que la partícula alcanza completamente el punto de isodensidad; El tiempo de centrifugación de una centrifugación con gradiente de densidad se refiere al tiempo para formar una zona bien definida. Para los dos últimos métodos de centrifugación, el tiempo requerido de formación de la zona o el tiempo de equilibrio es complicado y se puede determinar después de la prueba.
En segundo lugar, la velocidad centrífuga.
La velocidad de rotación de la centrífuga está determinada principalmente por la velocidad de rotación del rotor y el radio de rotación de las partículas. Al describir las condiciones centrífugas, a menudo se expresa mediante el campo de fuerza centrífuga relativa. En el trabajo real, los datos del campo de fuerza centrífuga se refieren al valor promedio, es decir, se refiere al campo de fuerza centrífuga de las partículas en el punto de la solución de centrifugación.
En tercer lugar, el pH y la temperatura del medio de centrifugado.
El valor de pH del medio de centrifugación generalmente se establece en el rango de pH en el que la enzima es estable. Se puede utilizar una solución tampón. En la prueba, se realiza el pesaje y el entorno de la centrífuga se corroe al evitar el entorno de perácido o sobrebase.
Cuando se trabaja con una centrífuga, además de prestar especial atención a la elección del medio centrífugo, también debemos controlar la temperatura y el pH de la solución del medio para evitar la aglutinación, desnaturalización y desactivación de las sustancias separadas. Controlaremos la temperatura de centrifugación a aproximadamente 4 ° C. Para algunas enzimas con buena estabilidad térmica, la centrifugación también se puede realizar a temperatura ambiente.