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Qué factores se deben considerar al elegir un espectrofotómetro UV

2022-07-12 12:01:33
La espectrofotometría se usa a menudo en mediciones de actividades enzimáticas, determinaciones de concentraciones de proteínas, determinaciones de constantes cinéticas enzimáticas y mediciones de reacciones de unión de ligandos.

Los espectrofotómetros UV se utilizan ampliamente en la investigación de química orgánica. Por lo general, se utiliza para la identificación de sustancias, el control de pureza y la investigación de la estructura molecular orgánica. En términos de cuantificación, se puede determinar el contenido de cada componente en compuestos y mezclas con estructuras complejas. También puede medir la constante de disociación de la sustancia, la constante de estabilidad del complejo, la identificación del peso molecular de la sustancia y el punto final de indicación en la microtitulación y como detector en la cromatografía líquida de alta resolución.


Elección del espectrofotómetro UV:

Cuando elegimos varios instrumentos, hay ciertos criterios, como la precisión de la medición o el rango de medición. Al elegir un espectrofotómetro UV, consideramos la construcción óptica, el rango espectral, el tipo de muestra y las herramientas analíticas.

La estructura óptica se refiere principalmente a si la luz proporcionada por el espectrofotómetro UV es un haz simple o doble. El haz único se mide con un solo haz de luz, la longitud de onda se proporciona durante el proceso de medición y luego los resultados de absorbancia se obtienen a través del objeto medido y el objeto de control. El haz doble está dividido en dos por una rueda de corte.

Las fuentes de luz incluyen luz infrarroja, ultravioleta y visible. Las lámparas de tungsteno y halógenas generalmente cubren solo la porción de luz visible. La lámpara de xenón puede cubrir las regiones de luz ultravioleta y visible.

Los espectrofotómetros UV-vis suelen utilizar tubos fotomultiplicadores y fotodiodos para medir la absorbancia.

El espectrofotómetro UV acepta pozos de muestras, cubetas, pipetas y microplacas para la mayoría de los tipos de muestras.

La mayoría de los espectrofotómetros UV autónomos incluyen un software que controla el instrumento y gestiona los datos. Los instrumentos de alto rendimiento, generalmente utilizados junto con una PC, requieren software adicional del fabricante. Al mismo tiempo, los usuarios también pueden optar por actualizar el software para satisfacer sus necesidades.

El principio de funcionamiento básico del espectrofotómetro UV:

El espectrofotómetro UV utiliza una cierta frecuencia de luz UV-visible para irradiar la sustancia orgánica analizada, provocando la transición de electrones de valencia en la molécula, que serán absorbidos selectivamente. Un conjunto de espectros cuya absorción varía con la longitud de onda, reflejando las características de la muestra. En el rango de luz ultravioleta y visible, para una longitud de onda específica, el grado de absorción es proporcional a la concentración del componente en la muestra, por lo que el espectro medido puede analizarse cualitativamente y en base a la comparación de la absorción con un patrón muestra de concentración conocida, también puede ser análisis cuantitativo.


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